Studi Komparatif Kondisi Inkubasi Lembab dan Kering terhadap Jumlah dan Viabilitas Sel Punca Mesenkimal pada Pasase 6–9

Abstract

Kondisi mikro-lingkungan kultur, khususnya kelembaban inkubator, merupakan faktor fisik penting yang dapat memengaruhi stabilitas fisiologis dan performa pertumbuhan sel in vitro. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh kondisi kelembaban inkubator terhadap jumlah dan viabilitas sel punca mesenkimal (Mesenchymal Stem Cell, MSC) pada pasase 6 hingga 9. Sel Merupakan MSC manusia yang berasal dari jaringan lemak donor dewasa yang telah dikarakterisasi positif terhadap penanda CD73, CD90, dan CD105 dan dikultur dalam media α-MEM yang diperkaya human platelet lysate serta antibiotik 1% penicillin-streptomycin pada kondisi normoksia (37°C, 5% CO₂). Dua kondisi inkubasi dibandingkan, yaitu kelembaban tinggi (RH ±95%) dan kelembaban rendah (RH <80%). Parameter yang diukur meliputi jumlah total sel, viabilitas sel menggunakan pewarnaan Trypan Blue, dan Population Doubling Time (PDT). Hasil menunjukkan bahwa kelembaban tinggi memberikan hasil yang signifikan terhadap peningkatan jumlah sel dan viabilitas (p<0,05). Rata-rata jumlah sel akhir pada kondisi lembab mencapai 23,36×10⁶ dengan viabilitas 90,23%, sedangkan pada kondisi kering hanya 5,56×10⁶ dengan viabilitas 81,13%. Perbedaan kelembaban juga memengaruhi PDT, di mana kondisi lembab menghasilkan pertumbuhan lebih cepat (0,33 hari⁻¹) dibandingkan kondisi kering (0,54 hari⁻¹). Dengan demikian, kelembaban tinggi berperan penting dalam menjaga stabilitas fisiologis dan mempercepat proliferasi MSC in vitro. Keterbatasan penelitian ini adalah tidak dilakukannya pengukuran langsung osmolaritas media selama inkubasi